GB/T 39729-2020 细胞纯度测定通用要求流式细胞测定法

GB/T 39729-2020.General requirements for measurement of cell purity- Flow cytometry. 1范围 GB/T 39729描述了流式细胞仪测定细胞纯度的术语、定义和缩略语.方法原理,以及包括试剂或材料.仪器设备、样本制备、试验步骤.数据分析、方法确认和报告的通用要求。 GB/T 39729适用于研究.生产与检验中通过流式细胞仪进行的细胞纯度的测定。 2规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3术语.定义和缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1.1 目标细胞 cell of testing target 与检测目标相一致,具有流式细胞仪可检测特征(如大小、数量.特定标志物)的细胞。 3.1.2 细胞纯度 cell purity 目标细胞占样本总细胞数量的百分率。 3.1.3 细胞染色 cell staining 细胞特定成分与荧光染料或标记了荧光染料的特异性抗体结合后进行检测的一种技术。 注:特定成分为蛋白质.DNA.RNA等. 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件。 FSC:前向角散射光( Forward Scatter) SSC:侧向角散射光(Side Scatter) 4方法原理 使用流式细胞仪,通过总细胞和目标细胞不同的光学(散射光和荧光)特性,对待测样本中的总细胞和目标细胞进行区分和计数。根据总细胞和目标细胞的测量数量,计算得到目标细胞纯度。 5通用要求 5.1试剂或材料 5.1.1荧光染料 选择的荧光染料应能被试验所用流式细胞仪的激光器激发,其激发光信号能被流式细胞仪的检测器接收。 5.1.2荧 光染料标记的抗体 确保选择的荧光染料标记的抗体对目标细胞具有特异性。 5.1.3鞘液 鞘液应为无荧 光本底的平衡电解质溶液，其洁净度、吸光度、pH值、渗透压应满足流式细胞仪的要求。