SN/T 1557-2005 禽痘琼脂免疫扩散试验操作规程

SN/T 1557-2005.Protocol of agar gel immunodiffusion test for fowl pox. 1范围 SN/T 1557规定了禽痘琼脂免疫打散试验操作方法。 SN/T 1557适用于禽痘病毒抗体的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(eqvISO3696:1987) 3器材与试剂. 3.1. 器材 3. 1.1 平皿:平皿直径为90 mm。 3.1.2 微量加样器。 3.1.3 塑料吸头。 3. 1.4 打孔器:内径4.0 mm,孔间距3.0 mm,7孔梅花样金属打孔器。 3.2 试剂 3.2.1禽痘琼脂免疫扩散试验抗原和标准阳性血清。 3.2.2琼脂糖。 4操作步骤 4.1琼脂板制备 称取琼脂糖1.0 g,加pH 7.2 0.01 mol/L 磷酸盐缓冲溶液至100 mL。 加热融化后,加入8.0g氯化钠,充分溶解后,加入1.0mL 1%硫柳汞溶液(终浓度为0. 01%)。 冷却至45°C~50°C,将洁净干燥、直径为90mm的灭菌平皿，放置于水平平台上，每个平皿加18mL,厚度约为3.0mm。 凝固后盖严,把平皿倒置放人4C冰箱中保存备用。 4.2打孔 反应孔现用现打。从冰箱内取出琼脂板,用7孔一组的梅花形打孔器进行打孔(中间1孔,外周6孔)(见图1),孔径4.0mm,孔距3.0mm。将孔中的琼脂糖轻轻挑出或吸出,勿伤及边缘或使琼脂层脱离玻璃。平皿中各孔排列见图2。