GB/T 38477-2020 基因表达的测定 蛋白印迹法

GB/T 38477-2020.Determination of gene expression-Western blot. 1范围 GB/T 38477规定了用蛋白印迹( Western blot)法测定基因表达的方法原理、试剂或材料、仪器设备、测定步骤和结果分析。 GB/T 38477适用于动植物组织或体外培养细胞目的基因表达测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语、定义和缩略语 3.1 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1.1 基因表达 gene expression 将储存在DNA分子中的遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子的过程。 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件。 BSA:牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin) ECL:增强型化学发光( Enhanced Chemiluminescence) SDS:十二烷基硫酸钠( Sodium Dodecyl Sulfate) SDS-PAGE:十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis) TBS: Tris缓冲盐溶液( Tris Buffered Saline) TBST :吐温-20/ Tris缓冲盐溶液(Tween-20/ Tris Buffered Saline) 4.原理 SDS-PAGE分离的蛋白质转移到转印膜上后，先用抗目的蛋白质的一抗与转印膜上的蛋白质反应,然后利用带标记的二抗与一抗反应,最后根据二抗标记物的特性,检测微量蛋白质。