GB/T 40254-2021 轮枝菌属实时荧光PCR检疫鉴定方法

GB/T 40254-2021.Detection and identification of Verticillium Nees using real-time PCR. 1范围 GB/T 40254描述了植物病原真菌轮枝菌属实时荧光聚合酶链式反应(PCR)检疫鉴定方法。 GB/T 40254适用于携带轮枝菌属病菌的土壤、植物及其产品中轮枝菌属病菌的检测筛查。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T 2589植物病原真菌检测规范 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4基本信息 中文名:轮枝菌属。 学名:Verticillium Nees. 轮枝菌属隶属于真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota) ,盘菌亚门( Pezizomycotina),粪壳菌纲(Sordariomycetes)中的小不整球壳科( Plectosphaerellaceae)。 传播途径:轮枝菌属病菌主要由种子传播,也可经病残体、土壤、风、灌溉水和昆虫传播。 5鉴定原理 根据轮枝菌属病菌的DNA序列特征及实时荧光PCR原理,应用所设计引物或探针对轮枝菌属病菌进行检测鉴定。 6仪器设备和器具、试剂和培养基 6.1 仪器设备和器具 高压灭菌锅、显微镜、解剖镜、天平、水浴锅、制冰机、纯水仪、涡旋振荡器、微量紫外分光光度计、高 速冷冻离心机、冰箱、超净工作台、生化培养箱、通风橱、实时荧光PCR仪、微量移液器(0.1μL.~2.5μL、 1 μL~10 μL、10 μL~50 μL、20 μL~200 μL、100 μL~1 000 μL)、锥形瓶、培养皿、载玻片、盖玻片。